Kit de prueba Elisa Anti-VHC con alta especificidad para 96 pruebas y tiempo de ensayo de 1.5-3 horas

El ensayo Anti-VHC es un inmunoensayo enzimático ligado a un soporte (ELISA) para la determinación cualitativa del virus VHC en suero y plasma humanos.

El virus de la hepatitis C es la causa más común de hepatitis no A, no B postransfusional y adquirida en la comunidad en todo el mundo. La infección por VHC frecuentemente conduce a hepatitis crónica y cirrosis, y se asocia con el desarrollo de carcinoma hepatocelular. El virus de la hepatitis C es un virus de ARN monocatenario de sentido positivo y envuelto, que ha sido clasificado como un género propio en la familia Flaviviridae. El genoma consta de aproximadamente 9.5 kb que codifican un polipéptido de 3000 aminoácidos de dominios estructurales y no estructurales. Al igual que otros virus de ARN, el genoma del VHC exhibe una heterogeneidad sustancial como resultado de mutaciones que ocurren durante la replicación viral. A nivel mundial, se han descrito al menos 11 genotipos genéticamente distintos y múltiples subtipos y variantes virales. La infección con genotipos específicos puede afectar la gravedad de la enfermedad y la respuesta al tratamiento. La hepatitis C se transmite principalmente a través de sangre y productos sanguíneos contaminados y, en menor medida, por secreciones corporales humanas.

Método indirecto. Duración total del ensayo: 100 minutos

El ELISA Anti-VHC emplea un método ELISA indirecto en fase sólida para la detección de anticuerpos contra el VHC en un procedimiento de incubación en dos pasos. Las tiras de microplacas de poliestireno están pre-recubiertas con antígenos recombinantes altamente inmunorreactivos que corresponden a las regiones del núcleo y no estructurales del VHC (NS3, NS4 y NS5), que pueden detectar todos los genotipos del VHC. Durante el primer paso de incubación, los anticuerpos específicos Anti-VHC, si están presentes, se unirán a los antígenos del VHC pre-recubiertos en fase sólida. Los pocillos se lavan para eliminar las proteínas séricas no unidas, y se añaden anticuerpos anti-IgG humanos de ratón (anti-IgG) conjugados con la enzima horseradish peroxidasa (HRP-Conjugado). Durante el segundo paso de incubación, estos anticuerpos HRP-conjugados se unirán a cualquier complejo antígeno-anticuerpo (IgG) formado previamente y el HRP-conjugado no unido se elimina mediante lavado. Se añaden soluciones de cromógeno que contienen Tetrametilbencidina (TMB) y peróxido de urea a los pocillos y, en presencia del inmunocomplejo antígeno-anticuerpo-anti-IgG (HRP), los cromógenos incoloros son hidrolizados por el conjugado HRP unido a un producto de color azul. El color azul se vuelve amarillo después de detener la reacción con ácido sulfúrico. La intensidad del color se puede medir y es proporcional a la cantidad de anticuerpo capturado en los pocillos, y a la cantidad de anticuerpo en la muestra respectivamente. Los pocillos que contienen muestras negativas para Anti-VHC permanecen incoloros.