PC del equipo 96 de la prueba de la hormona de la tira de prueba de la LH de Elisa ISO13485 Luteinizing

LH Elisa Kit Luteinizing Hormone

1. Uso previsto

Immunoensayo para la determinación cuantitativa in vitro de la hormona luteinizing en suero humano.

2. Resumen

• La LH (hormona luteinizing), así como FSH (hormona el estimular de folículo), pertenece a la familia de la gonadotropina. La LH y FSH regulan y estimular el crecimiento y la función de las gónadas (los ovarios y los testículos) sinérgico. Como FSH, TSH y el hCG, LH es una glicoproteína que consiste en dos subunidades (α- y las β-cadenas). (1, 2, 3) este proteohormone, que consiste en 121 aminoácidos y tres cadenas del azúcar, tiene un peso molecular de 29500 daltons. En mujeres, las gonadotropinas actúan dentro del circuito de regulación del hipotálamo-pituitario-ovario para controlar el ciclo menstrual.
• La LH y FSH se lanzan en pulsos de las células gonadotropas del pituitario anterior y del paso vía la circulación sanguínea a los ovarios. Aquí las gonadotropinas estimulan el crecimiento y la maduración del folículo y por lo tanto de la biosíntesis de estrógenos y de progesteronas. Las LH-concentraciones más altas ocurren durante el pico de mitad de ciclo e inducen la ovulación y la formación del luteum de la recopilación, el producto principal de la secreción cuyo es la progesterona. En las células de Leydig de los testículos, la LH estimula la producción de testosterona. La determinación de la concentración de la LH se utiliza en la aclaración de disfunciones dentro del sistema de las hipotálamo-pituitario-gónadas. La determinación de la LH conjuntamente con FSH se utiliza para las indicaciones siguientes: enfermedades congénitas con las aberraciones de cromosoma (e.g. el síndrome de Turner), los ovarios policísticos (PCO), aclarando las causas de la amenorrea, síndrome menopáusico, y la escasez sospechosa de la célula de Leydig. (1, 4, 5)

3. Principio de la prueba

Principio del bocadillo. Duración total del análisis: 80 minutos.

• La muestra, Anti-LH cubrió microwells y se combina la Anti-LH etiquetada enzima.

• Durante la incubación, la LH presenta en la muestra se permite reaccionar

simultáneamente con los dos anticuerpos, dando por resultado las moléculas de la LH que son

intercalado entre la fase sólida y los anticuerpos enzima-ligados.

• Después del lavado, un complejo se genera entre la fase sólida, la LH dentro de la muestra y los anticuerpos enzima-ligados por reacciones inmunológicas.

• La solución del substrato después es añadida y catalizada por este complejo, dando por resultado una reacción cromogénica. La reacción cromogénica resultante se mide como absorción.

• La absorción es proporcional a la cantidad de LH en la muestra.

Reactivo

Materiales proporcionados

• Microplate cubierto, 8 X12 tiras, 96 pozos, cubiertos primero con el ratón monoclonal

ANTI-LH.

• Calibradores, 6 frascos, 1 ml cada uno, listos para utilizar; Concentraciones: 0 (A), 5 (B), 20 (C), 50 (D), 100 (E) y 200 (F) mIU/mL.

• La conjugación de la enzima, 1 frasco, 11 ml de HRP (peroxidasa del rábano picante) etiquetó el ratón Anti-LH monoclonal en el almacenador intermediario Tris-NaCl que contenía BSA (albúmina del suero vacuno). Contiene 0,1% preservativos ProClin300.

• Substrato, 1 frasco, 11ml, listo para utilizar, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Pare la solución, 1 frasco, 6,0 ml de 1 mol/L del ácido sulfúrico.

• Concentrado de la solución del lavado, 1 frasco, 25 ml (40X concentró), PBS-tween

solución del lavado.

• IFU, 1 copia.

• Tapa de la placa: 1 pedazo.

Materiales requeridos (pero no proporcionado)

• Lector de Microplate con capacidad absorbente de la longitud de onda 450nm y 620nm.

• Lavadora de Microplate.

• Incubadora

4. Método de prueba

• Utilice solamente el número de pozos requeridos y dé formato a los pozos de los microplates para

cada calibrador y muestra que se probarán.

• Añada el μL 25 de calibradores o de muestras a cada pozo.

• Añada el μL 100 de la conjugación de la enzima a cada pozo.

• Sacuda el microplate suavemente por 30 segundos para mezclarse.

• Cubra la placa con una tapa de la placa e incube en el °C 37 por 60 minutos.

• Deseche el contenido de la placa micro por la decantación o la aspiración. Si

decantando, golpee ligeramente y borre el seco de placa con el papel absorbente.

• Añada el μL 350 de la solución del lavado, decántelo (golpecito y mancha blanca /negra) o aspírelo. Repita 4 veces adicionales para un total de 5 lavados. Una lavadora automatizada de la tira del microplate puede ser utilizada. En el final del lavado, invierta la placa y golpee ligeramente hacia fuera cualquier solución residual del lavado sobre el papel absorbente.

• Añada el μL 100 del substrato a cada pozo.

• Incube en la temperatura ambiente (18-25℃) en la oscuridad para la reacción por 20 minutos. No sacuda la placa después de la adición del subestado.

• Añada el μl 50 de la solución de la parada a cada pozo.

• Sacuda por 15-20 segundos para mezclar el líquido dentro de los pozos. Es importante para

asegúrese de que los cambios azules del color para amarillear totalmente.

• Lea la absorción de cada pozo en 450 nanómetro (usando 620 a 630 nanómetro como

longitud de onda de la referencia para minimizar imperfecciones bien) en un lector micro de la placa.