Datos del producto:
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Espécimen: | Suero | Almacenamiento: | 2-8℃ |
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EXP: | 24 meses | tamaño: | 96 pruebas/equipo |
Resaltar: | Peroxidasa anti Elisa Test de la tiroides,Equipos antis de la prueba del anticuerpo de TPO,Equipo anti de TPO Elisa Test |
Peroxidasa anti-TPO Elisa Kit del antitiroideo
1. Uso previsto
Immunoensayo para la determinación cuantitativa in vitro de anticuerpos a la peroxidasa de la tiroides en suero humano. La determinación anti del ‐ TPO se utiliza como ayuda en la diagnosis de las enfermedades de tiroides autoinmunes.
2. Resumen
3. Principio de la prueba
Método indirecto, duración total del análisis: 70 minutos.
El ELISA anti-TPO emplea la fase sólida, método indirecto de ELISA para la detección de anticuerpos a TPO en el procedimiento de dos etapas de la incubación. Las tiras del microwell del poliestireno son pre- cubiertas con los antígenos humanos altamente immunoreactive de TPO. Durante el primer paso de la incubación, los anticuerpos específicos antis-TPO, si son presentes, estarán limitados a la fase sólida cubrieron primero los antígenos de TPO. Los pozos se lavan para quitar las proteínas de suero desatadas, y los anticuerpos anti-humanos de IgG del conejo (antis-IgG) conjugados a la peroxidasa del rábano picante de la enzima (conjugación de HRP-) se añaden. Durante el segundo paso de la incubación, estos anticuerpos HRP-conjugados estarán limitados a cualquier complejo del antígeno-anticuerpo (IgG) formaron previamente y la HRP-conjugación desatada entonces es quitada lavándose. Las soluciones del cromógeno que contienen Tetramethylbenzidine (TMB) y el peróxido de la urea se añaden a los pozos y en la presencia del immunocomplex antígeno-anticuerpo-anti-IgG (HRP), los cromógenos descoloridos son hidrolizados por la conjugación encuadernada de HRP a un producto azul-coloreado. El color azul da vuelta amarillo después de parar la reacción con el ácido sulfúrico.
La cantidad de intensidad del color puede ser medida y es proporcional a la cantidad de anticuerpo capturada en los pozos, y a la cantidad de anticuerpo en la muestra respectivamente.
4. Los materiales los reactivo proporcionaron
• Microplate cubierto, 8 X12 tiras, 96 pozos. Cubierto primero con el antígeno humano de TPO.
• Calibradores, 6 frascos, 1 ml cada uno, listos para utilizar; Concentraciones: 0 (A), 25 (B), 50 (C), 100 (D), 250 (E) y 500 (F) IU/mL.
• La conjugación de la enzima, 1 frasco, 11,0 ml de HRP (peroxidasa del rábano picante) etiquetó el conejo los anticuerpos humanos antis de IgG (antis-IgG) en el almacenador intermediario Tris-NaCl que contenía BSA (albúmina del suero vacuno). Contiene 0,1% preservativos ProClin300.
• Diluyente del suero: 1 frasco, 11mL. Contener sales del almacenador intermediario y un tinte
• Concentrado de la solución del lavado, 1 frasco, 25 ml (40X concentró), solución del lavado del PBS-tween.
• Substrato, 1 frasco, 11ml, listo para utilizar, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Pare la solución, 1 frasco, 6,0 ml de 1 mol/l del ácido sulfúrico.
• IFU, 1 copia.
• Tapa de la placa: 2 pedazos.
Materiales requeridos (pero no proporcionado)
• Lector de Microplate con capacidad absorbente de la longitud de onda 450nm y 620nm.
• Lavadora de Microplate.
• Incubadora.
• Coctelera de la placa.
• Micropipetas y micropipetas de varios canales que entregan 50µl con una precisión de mejor de 1,5%.
• Papel absorbente.
• Agua destilada
5. Método de prueba
• Utilice solamente el número de pozos requeridos y dé formato a los pozos del microplate para que cada calibrador y muestra sean probados.
• Añada el µL 100 de calibradores a cada pozo.
• Añada el µL 100 del diluyente de la muestra (color verde) a cada pozo excepto los Calibrador-pozos.
• Añada el µL 10 de la muestra a cada pozo del diluyente de la muestra (NOTA: Los reactivo en Wells darán vuelta a color azul del verde), después sacuden 30 segundos.
• Cubra la placa con una tapa de la placa e incube en el °C 37 por 30 minutos.
• Deseche el contenido de la placa micro por la decantación o la aspiración. Si decanta, golpee ligeramente y borre el seco de placa con el papel absorbente.
• Añada el µL 350 de la solución del lavado, decántelo (golpecito y mancha blanca /negra) o aspírelo. Repita 4 veces adicionales para un total de 5 lavados. En el final del lavado, invierta la placa y golpee ligeramente hacia fuera cualquier solución residual del lavado sobre el papel absorbente.
• Añada el µL 100 de la conjugación de la enzima,
• Cubra la placa con una tapa de la placa e incube en el °C 37 por 30 minutos.
• Añada el µL 350 de la solución del lavado, decántelo (golpecito y mancha blanca /negra) o aspírelo. Repita 4 veces adicionales para un total de 5 lavados. En el final del lavado, invierta la placa y golpee ligeramente hacia fuera cualquier solución residual del lavado sobre el papel absorbente.
• Añada el µL 100 del substrato a cada pozo. Cubra e incube en la temperatura ambiente (18-25℃) en la oscuridad para la reacción por 10 minutos. No sacuda la placa después de la adición del subestado.
• Añada el µL 50 de la solución de la parada a cada pozo.
• Sacuda por 15-20 segundos para mezclar el líquido dentro de los pozos. Es importante asegurarse de que los cambios azules del color a amarillear totalmente.
• Lea la absorción de cada pozo en 450 nanómetro (usando 620 a 630 nanómetro como la longitud de onda de la referencia para minimizar imperfecciones bien) en un lector micro de la placa. Los resultados se deben leer en el plazo de 30 minutos de adición paran la solución.
Persona de Contacto: Mr. Steven
Teléfono: +8618600464506