Kit de pruebas ELISA de la TB-IGRA

1Principio.

TB-IGRA es unaen el laboratorioprueba de diagnóstico que detecta respuestas inmunitarias mediadas por células aLa tuberculosis por Mycobacterium(MTB) mediante la medición del interferón gamma (IFN-γ) liberado por las células T sensibilizadas tras la estimulación con antígenos específicos de MTB (por ejemplo, ESAT-6, CFP-10 y TB7.7).

2. Características clave

• Alta especificidad:

  • Utiliza antígenos específicos de la MTB (ausentes en el BCG y la mayoría de las micobácterías no tuberculosas), minimizando los falsos positivos.

• Alta sensibilidad:

  • Detecta tanto la tuberculosis activa como la infección por tuberculosis latente (IBT) con una precisión superior en comparación con la prueba cutánea de tuberculina (TST).

• Resultados cuantitativos y cualitativos:

  • El resultado varía según la plataforma (por ejemplo, recuentos puntuales en los ensayos ELISPOT o concentración de IFN-γ en ELISA).

• Reacción rápida: Los resultados están normalmente disponibles en24 horas 48 horas.

3Requisitos de muestra

• Tipo de muestra: Sangre entera periférica fresca (heparinizada).

• El volumenPor lo general:1 ¢ 3 mlpor ensayo (varía según el fabricante del kit).

• Almacenamiento: Proceso en el interior8 ∙ 32 horas(dependiendo de las especificaciones del kit).

4Procedimiento de evaluación

1. Estimulación: Incubación de sangre con antígenos MTB y controles (control negativo/mitógeno).

2. Detección de IFN-γ:

   • Basado en ELISPOT (por ejemplo, T-SPOT.TB): Contar las células T secretoras de IFN-γ como manchas.

   • Basado en ELISA (por ejemplo, QuantiFERON-TB Gold): Mide la concentración de IFN-γ mediante un ensayo inmunológico.

3. Interpretación:

   • Los resultados comparados con los valores límite (varian según el ensayo).

   • Los resultados indeterminados pueden requerir una nueva prueba.

5. Métricas de rendimiento

• Sensibilidad: > 90% para la TB activa, ~ 80% para el LTBI.

• Especificidad: >95% (no afectado por la vacunación con BCG).

• Reactividad cruzada: Mínimo con las micobacterias no tuberculosas (NTM).

6. Indicaciones

• Detección de LCT en grupos de alto riesgo (por ejemplo, VIH+, pacientes inmunodeprimidos, contactos cercanos).

• Prueba complementaria para el diagnóstico de tuberculosis activa (debe correlacionar con los síntomas clínicos y otras pruebas).

7Ventajas sobre el TST

• No hay reacción cruzada con BCG.

• Prueba de una sola visita (sin devolución de la lectura).

• Resultados objetivos basados en el laboratorio.

8Las limitaciones

• No se puede distinguir la TB activa de la LBI.

• Requiere equipo de laboratorio especializado.

• Un costo más alto que el de TST.

• Posibles falsos negativos en pacientes inmunodeprimidos.

9. Kit compatibles (ejemplos)

• T-SPOT.TB(Oxford Immunotec): basado en ELISPOT.

• Cuantiferón-TB Oro más(Qiagen): basado en ELISA.

10. Estado regulador

• Aprobado por la FDA/CE/OMS para la detección de infecciones por tuberculosis.

En el diagnóstico in vitro

Solo para uso

Este kit contiene reactivos suficientes para probar un máximo de 28 muestras en una prueba.

1Control negativo (capa gris)

2. Antígeno de la TB, liofilizado (capa púrpura)

3Diluente de antígeno para la TB (capa púrpura)

4- Control positivo (capa roja) 28 pruebas 28 pruebas 0,9 ml 28 pruebas

Componentes del ELISA

1. Las tiras de microplacas

2. IFN-γ estándar humano, liofilizado (pálido azul)

3. Diluyente

4Anticorpos etiquetados con biotina (capullo amarillo) 12 x 8 pozos 2 x vial 1 x 40 ml 1 x 6 ml

5. Conjugado de enzimas 100X concentrado (botella marrón) 1 x 130μL

6. Lavar con amortiguador 10X Concentrar 1 x 40 ml

7. Solución de cromógeno A

8. Solución de cromógeno B

9. Solución de detención 1 x 6 ml 1 x 6 ml 1 x 6 ml

PRINCIPIO de la prueba