Kit de pruebas de ELISA de la vitamina D 25-OH

Uso previsto

Kit de detección de vitamina D 25-OH (ensayo inmunosorbente ligado a enzimas, ELISA). Se utiliza en pruebas cuantitativas de vitamina D en suero humano.

Resumen Y Significado clínico

La vitamina D es un precursor de la hormona liposoluble que se produce principalmente en la piel por exposición a la luz solar.Nuestro cuerpo sólo puede sintetizar vitamina D3La vitamina D2 se absorbe con alimentos enriquecidos o se administra mediante suplementos.la vitamina D3 y la vitamina D2 se unen a la proteína de unión a la vitamina D (VDBP) en el plasma y se transportan al hígado para convertirse en 25-hidroxivitamina D (25-OHvitamina D)Dado que la vitamina D de 25-OH es la forma de almacenamiento principal, su concentración en sangre se utiliza para evaluar el estado general de la vitamina D. Más del 95% de la vitamina D de 25-OH, medible en suero, se encuentra en la sangre.La vitamina D3 es 25-OH, mientras que la vitamina D2 sólo alcanza niveles medibles en pacientes que toman suplementos de vitamina D2.La vitamina D es esencial para la salud de los huesos. En los niños, la deficiencia grave conduce al raquitismo. En los ancianos, el riesgo de caídas se ha atribuido a la deficiencia de vitamina D debido a la debilidad muscular.,Las concentraciones bajas de vitamina D 25-OH se asocian con una menor densidad mineral ósea. La insuficiencia también se ha relacionado con diabetes, cáncer, enfermedades cardiovasculares y enfermedades autoinmunes.Ambos suplementos dietéticos de vitamina D que están actualmente disponibles en el mercado (vitamina D2 y vitamina D3) se convierten en vitamina D 25-OH en el hígadoLa suma de las concentraciones de vitamina D2 y vitamina D3 en suero o plasma se denomina vitamina D total.La monitorización precisa del nivel total de vitamina D 25-OH es crítica en los entornos clínicos. Vitamin D deficient patients who are prescribed a daily Vitamin D supplement should regularly monitor their serum or plasma Vitamin D levels in order to reach an optimal level and prevent their 25-OH Vitamin D concentrations from reaching excessive levels that are considered toxicEl análisis total de vitamina D emplea anticuerpos especiales para capturar tanto la 25-hidroxivitamina D3 como la D2.Este ensayo está destinado a la determinación cuantitativa de la vitamina D total de 25-OH en suero humano y plasma., como ayuda en la evaluación de la suficiencia de vitamina D.

Principio

El kit de prueba cuantitativa de vitamina D 25-OH se basa en un ensayo de inmunosorbente ligado a enzimas en fase sólida.El sistema de ensayo utiliza un anticuerpo para la inmovilización en fase sólida (pozos de microtiter) y otro anticuerpo monoclonal en las soluciones.El tercer anticuerpo que reconoce el segundo anticuerpo conjugado con una enzima (peroxidasa de rábano).se añaden las normas y la muestra de ensayo (suero) a los pozos de microtiter recubiertos con anticuerpos de vitamina D de 25-OH, incubación 30 minutos junto con el segundo anticuerpo. Después del lavado, se agrega el tercer anticuerpo etiquetado con peroxidasa de rábano picante (conjugado). Si la vitamina D 25-OH humana está presente en la muestra,se combinará con el anticuerpo en el pozo y con el conjugado de enzimas, lo que dará lugar a la formación de sándwiches entre la fase sólida y los anticuerpos ligados a la enzima.Los pozos se lavan con agua para eliminar los anticuerpos no unidos etiquetadosSe añade una solución de TMB e incuba durante 20 minutos, dando como resultado el desarrollo de un color azul.El color se cambia a amarillo y se mide espectrofotométricamente a 450 nmLas concentraciones de vitamina D son directamente proporcionales a la intensidad del color de la muestra de ensayo.

Reactivos suministrados

Microplacas recubiertas: 1 placa (8×12 pozos), lista para el uso. placa de microtiter monoclonal anti- 25-OH anticuerpo de vitamina D recubierta y sellada en una bolsa de aluminio.Retire las tiras de la bolsa resecable con un desecante para protegerlas de la humedad una vez abiertas.Conservar a 2° o 8°C hasta la fecha de caducidad.

HRP conjugado:1 vial de 22 ml, listo para el uso.

Calibrador:6 viales de 0,2 ml, etiquetados con S0 a S5 y con una concentración de PRL de 0, 10, 20, 50,100, 150 ng/ ml. Conservar a una temperatura de 2 a 8°C hasta la fecha de caducidad.

Control:2 viales de 0,2 ml.

Diluente para muestras de vitamina D:1 vial de 22 ml, listo para usar, conservado a 2°C a 8°C hasta la fecha de caducidad.

Substrato TMB:1 vial de 12 ml, listo para el uso.

Detener la Solución:1 vial de 12 ml, listo para el uso.

El tampón de lavado:1 vial de 15 ml, Concentrar 50 veces, diluir con agua desionizada antes del ensayo.

El sellador de placas:Dos piezas.

Bolsas de plástico que se pueden volver a cerrar:Un juego.

Manual de instrucciones:Una copia.

Preparaciones

1Se deja que todas las muestras y los reactivos alcancen la temperatura ambiente (~ 25°C) y se mezcla bien mediante una reversión suave antes de su uso.

2.Preparar el amortiguador de lavado diluyendo el concentrado de lavado 20 veces con agua desionizada. La solución de lavado diluida es estable a temperatura ambiente durante al menos una semana.

Precauciones para los usuarios

1La manipulación debe excluir cualquier pipetaje por vía oral.

2No mezcle los materiales de diferentes lotes maestros. No use los componentes del kit después de la fecha de caducidad.

3. Todos los materiales deben estar a temperatura ambiente antes de su uso.