Kit de ensayo de ELISA cuantitativo HBsAb

Uso previsto

  The purpose of the HBsAb quantitative ELISA Test is for in vitro quantitative determination of antibodies to hepatitis B virus surface antigen in human serum or plasma for clinical purposes and assessing antibody response levels to HBsAg vaccine.

PRINCIPIO de la prueba

Para el HBsAb, el kit de ensayo cuantitativo de ELISA utiliza el método de ELISA “sandwich” de antígeno en el que las tiras de microgolpe de poliestireno se recubren previamente con HBsAg recombinante.La prueba comienza con la adición de una combinación de muestra de suero o plasma del paciente a la perioxidasa de rábano horseradish (HRP-Conjugate) a los microondas.Si los anti-HBs están presentes, los antígenos pre-revestidos y conjugados se unirán a los dos dominios variables del anticuerpo.Se forma un complejo inmunológico específico y se captura en la fase sólida durante la incubaciónCuando se completa el lavado (para eliminar los conjugados HRP no unidos y las proteínas séricas de la muestra), se añaden a los pozos soluciones de cromógeno que contienen tetrametilbenzidina (TMB) y peróxido de urea.Los cromógenos incolores son hidrolizados por el conjugado HRP unido a un producto de color azul cuando hay presencia de complejo sandwich antígeno-anticuerpo-antígeno (HRP).Después de detener la reacción con ácido sulfúrico, el color azul se vuelve amarillo. La intensidad del color se puede medir proporcionalmente a la cantidad de anticuerpos capturados en los pozos,y a la cantidad de la muestraLos pozos permanecen incoloros si el resultado anti-HBs es negativo.

Materiales y componentes

Este kit contiene reactivos suficientes para ensayar un máximo de 91 muestras en una prueba.La placa está sellada en una bolsa de aluminio con desecanteCada pozo contiene HBsAg recombinante. Las tiras de microondas pueden romperse para utilizarse por separado.Colocar los pozos o tiras no utilizados en la bolsa de plástico sellable provista junto con el desecante y volver a 2-8 °CUna vez abierto, estable durante un mes a 2-8°C. CALIBRADORES: ((1x0, 5 ml por vial) Seis vial de referencia para HBsAb a niveles de 0 ((A),10.0(B),20.0(C),40.0(D),80.0(E) y 160.0(F) mUI/ ml. Conservar a 2-8°C. Listo para usar según lo suministrado. Una vez abierto, estable durante un mes a 2-8°C. CONJUGADO: (1x6ml por vial) conservado.0.1% ProClinTM 300 Líquido de color rojo en un vial blanco con tapa de tornillo rojo. Antígenos HBsAg conjugados con peroxidasa de rábano. Listo para usar según lo suministrado. Una vez abierto, estable durante un mes a 2-8°C.Lavar con amortiguador: (1x20 ml por frasco) DILUIR ANTES DE USAR! detergente Tween-20 líquido incoloro llenado en una botella blanca con tapa de tornillo blanca, PH 7.4, 20 × PBS. El concentrado debe diluirse de 1 a 19 veces con agua destilada/deionizada antes de su uso. Una vez diluido, es estable durante una semana a temperatura ambiente o durante dos semanas cuando se almacena a 2-8°C.Solución de sustrato A: (1x6 ml por vial) Líquido incoloro lleno en un vial blanco con tapa de tornillo verde. Solución de peróxido de urea. Listo para usar según lo suministrado. Una vez abierto, estable durante un mes a 2-8°C. Solución de sustrato B:(1x6 ml por vial) Líquido incoloro llenado en un vial negro con tapa de tornillo negro. Solución de TMB (tetrametilbenzidina). Listo para el uso tal y como se suministra. Una vez abierto, estable durante un mes a 2-8°C. Solución final: (1x6 ml por vial) Líquido incoloro en un vial blanco con tapa de tornillo blanca.Solución diluida de ácido sulfúrico (0.5M H2SO4).Listo para su uso tal y como viene suministrado. Una vez abierto, estable durante un mes a 2-8°C.Para recubrir las tiras que no se utilicen 1 unidad INSERTA DE PACACACIÓN 1 copia COVERA DE LA PLATA DE CARTO 2 hojas Para cubrir las placas durante la incubación y evitar la evaporación o la contaminación de los pozos.

Materiales requeridos pero no suministrados

Agua recién destilada o desionizada, guantes desechables y temporizador, recipientes de desechos adecuados para materiales potencialmente contaminados, sistema de distribución y/o pipeta, puntas desechables de pipeta,tejido absorbente o toalla limpia, incubadora seca o baño de agua, 37±0,5°C, lector de placas, longitud de onda única 450nm o doble 450/630nm, sistema de aspiración/lavado de microondas.