Equipo anti de la prueba del Tg Ab de la tiroglobulina de BIOVANTION de la prueba anti del anticuerpo

PRUEBA KIT Thyroglobulin Ab del Anti-Tg ELISA

1. Uso previsto

Immunoensayo para la determinación cuantitativa in vitro de anticuerpos a la tiroglobulina en suero humano. La determinación anti del Tg del ‐ se utiliza como ayuda en la detección de enfermedades de tiroides autoinmunes.

2. Resumen

La tiroglobulina (Tg) se produce en la glándula tiroides y es un componente principal en el lumen del folículo de la tiroides. En sinergia con la peroxidasa específica del ‐ de la tiroides de la enzima (TPO), el Tg tiene una función esencial en la yodación de L tirosina del ‐ y en la formación de las hormonas tiroideas T4 y T3. Los Tg y TPO son potencialmente autoantigenic.

Las concentraciones elevadas del suero de anticuerpos contra Tg (autoanticuerpos del ‐ del Tg) se encuentran en temas con el ‐ de la autoinmunidad basaron tiroiditis. Las altas concentraciones del ‐ anti Tg así como el ‐ anti TPO son indicativas de la tiroiditis infiltrativa del ‐ linfocítico crónico (la enfermedad de Hashimoto). La frecuencia de los anticuerpos de la tiroglobulina es aproximadamente 70 el ‐ el 80% en temas con tiroiditis autoinmune del ‐, incluyendo la enfermedad de Hashimoto, y el aproximadamente 30% en individuos con la enfermedad de sepulcros. El análisis anti del Tg del ‐ es importante para el uso en la supervisión del curso de la tiroiditis de Hashimoto y para la diagnosis diferenciada (casos de la tiroiditis autoinmune sospechosa del origen desconocido con resultados de la prueba antis negativos del ‐ TPO, la enfermedad de sepulcros sin la infiltración linfocítica, y eliminar interferencia por los autoanticuerpos del ‐ del Tg en la prueba del Tg).

Aunque la sensibilidad del procedimiento pueda ser aumentada simultáneamente determinando los anticuerpos adicionales de la tiroides (‐ anti TPO, los anticuerpos del ‐ del receptor del ‐ de TSH), un resultado negativo no elimina definitivo la presencia de una enfermedad autoinmune. El nivel del título del anticuerpo no correlaciona con la actividad clínica de la enfermedad. Los títulos que se elevan inicialmente pueden llegar a ser negativos si la enfermedad persiste por un periodo de tiempo más largo o si

la remisión ocurre. Si los anticuerpos reaparecen después de la remisión, una recaída es probable.

La enzima ligó análisis del inmunosorbente utiliza los anticuerpos humanos de IgG del antihuman del antígeno y del conejo (antis-IgG).

los materiales 3.Reagents proporcionaron

• Microplate cubierto, 8 X12 tiras, 96 pozos. Cubierto primero con el antígeno humano del TG.

• Calibradores, 6 frascos, 1 ml cada uno, listos para utilizar; Concentraciones: 0 (A), 50 (B), 150 (C), 500 (D), 1000 (E) y 2000 (F) IU/mL.

• La conjugación de la enzima, 1 frasco, 11,0 ml de HRP (peroxidasa del rábano picante) etiquetó el conejo los anticuerpos humanos antis de IgG (antis-IgG) en el almacenador intermediario Tris-NaCl que contenía BSA (albúmina del suero vacuno). Contiene 0,1% preservativos ProClin300.

• Diluyente del suero: 1 frasco, 11mL. Contener sales del almacenador intermediario y un tinte

• Concentrado de la solución del lavado, 1 frasco, 25 ml (40X concentró), solución del lavado del PBS-tween.

• Substrato, 1 frasco, 11ml, listo para utilizar, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Pare la solución, 1 frasco, 6,0 ml de 1 mol/l del ácido sulfúrico.

• IFU, 1 copia.

• Tapa de la placa: 2 pedazos.

4. Materiales requeridos (pero no proporcionado)

• Lector de Microplate con capacidad absorbente de la longitud de onda 450nm y 620nm.
• Lavadora de Microplate.
• Incubadora.
• Coctelera de la placa.
• Micropipetas y micropipetas de varios canales que entregan 50µl con una precisión de mejor de 1,5%.
• Papel absorbente.
• Agua destilada

5. Método de prueba

• Utilice solamente el número de pozos requeridos y dé formato a los pozos del microplate para que cada calibrador y muestra sean probados.

• Añada el µL 100 de calibradores a cada pozo.

• Añada el µL 100 del diluyente de la muestra (color verde) a cada pozo excepto los Calibrador-pozos.

• Añada el µL 10 de la muestra a cada pozo del diluyente de la muestra (NOTA: Los reactivo en Wells darán vuelta a color azul del verde), después sacuden 30 segundos.

• Cubra la placa con una tapa de la placa e incube en el °C 37 por 30 minutos.

• Deseche el contenido de la placa micro por la decantación o la aspiración. Si decanta, golpee ligeramente y borre el seco de placa con el papel absorbente.

• Añada el µL 350 de la solución del lavado, decántelo (golpecito y mancha blanca /negra) o aspírelo. Repita 4 veces adicionales para un total de 5 lavados. En el final del lavado, invierta la placa y golpee ligeramente hacia fuera cualquier solución residual del lavado sobre el papel absorbente.

• Añada el µL 100 de la conjugación de la enzima,

• Cubra la placa con una tapa de la placa e incube en el °C 37 por 30 minutos

• Añada el µL 350 de la solución del lavado, decántelo (golpecito y mancha blanca /negra) o aspírelo. Repita 4 veces adicionales para un total de 5 lavados. En el final del lavado, invierta la placa y golpee ligeramente hacia fuera cualquier solución residual del lavado sobre el papel absorbente.

• Añada el µL 100 del substrato a cada pozo. Cubra e incube en la temperatura ambiente (18-25℃) en la oscuridad para la reacción por 10 minutos. No sacuda la placa después de la adición del subestado.

• Añada el µL 50 de la solución de la parada a cada pozo.

• Sacuda por 15-20 segundos para mezclar el líquido dentro de los pozos. Es importante asegurarse de que los cambios azules del color a amarillear totalmente.

• Lea la absorción de cada pozo en 450 nanómetro (usando 620 a 630 nanómetro como la longitud de onda de la referencia para minimizar imperfecciones bien) en un lector micro de la placa. Los resultados se deben leer en el plazo de 30 minutos de adición paran la solución.