PIE3S Elisa Test Kit análisis de sangre libre del T3 del Triiodothyronine libre de 110 minutos

PIE3S
EQUIPO DE LA PRUEBA DE LOS PIE3S ELISA

Triiodothyronine libre 96 pruebas

1. Uso previsto
Immunoensayo para la determinación cuantitativa in vitro del triiodothyronine libre en suero humano.

2. Resumen

• El Triiodothyronine es una de las hormonas tiroideas presenta en el suero que regula metabolismo. La determinación de esta concentración de la hormona es importante para la diferenciación de diagnóstico de eutiroide, del hyperthyroid, y de estados hipotiroideos. La fracción principal del triiodothyronine total está limitada a las proteínas de transporte (TBG, prealbumin, albúmina).
• El triiodothyronine libre (pie3) es la forma fisiológico activa del triiodothyronine de la hormona tiroidea (T3).
• La determinación del T3 libre tiene la ventaja de ser independiente de cambios en las concentraciones y las propiedades de atascamiento de las proteínas obligatorias; la determinación adicional de un parámetro obligatorio (T-absorción, TBG) es por lo tanto innecesaria. En la función normal de la tiroides, como las concentraciones de las proteínas de portador alteran, los cambios totales del nivel T3 de modo que la concentración de los PIE3S siga siendo constante.
• Así, las medidas de las concentraciones de los PIE3S correlacionan más confiablemente con la situación clínica que los niveles totales T3.
• o ejemplo, el aumento en los niveles totales T3 asociados a embarazo, contraceptivos orales y resultado de la terapia del estrógeno en niveles más altos del T3 del total mientras que el centration de la estafa de los PIE3S sigue siendo básicamente sin cambios.  Además, se ha encontrado que el valor malo de los PIE3S tiene una pendiente que disminuye de joven a más viejo.
 
• Reactivo

3. Materiales proporcionados
• Microplate cubierto, 8 X12 tiras, 96 pozos, cubiertos primero con el T3 derivant.
• Calibradores, 6 frascos, 1 ml cada uno, listos para utilizar; Concentraciones: 0 (A), 2 (B), 5 (C), 10 (D), 20 (E) y 50 (F) pmol/L.
• La conjugación de la enzima, 1 frasco, 6,0 ml de HRP (peroxidasa del rábano picante) etiquetó ovejas Anti-T3 monoclonal en el almacenador intermediario Tris-NaCl que contenía BSA (albúmina del suero vacuno). Contiene 0,2% preservativos ProClin300.
• Substrato, 1 frasco, 11ml, listo para utilizar, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Pare la solución, 1 frasco, 6,0 ml de 1 mol/l del ácido sulfúrico.
• Concentrado de la solución del lavado, 1 frasco, 25 ml (40X concentró), solución del lavado del PBS-tween.
• IFU, 1 copia.
• Tapa de la placa: 1 pedazo.

Materiales requeridos (pero no proporcionado)
• Lector de Microplate con capacidad absorbente de la longitud de onda 450nm y 620nm.
• Lavadora de Microplate.
• Incubadora.
• Coctelera de la placa.
• Micropipetas y micropipetas de varios canales que entregan 50μl con una precisión de mejor de 1,5%.
• Papel absorbente.
• Agua destilada.

4. Producción de la prueba

Asegúrese que las muestras, los calibradores, y los controles de los pacientes estén en la temperatura ambiente (℃ 18-25) antes de medida. Mezcle todos los reactivo con suavemente la inversión antes de uso.

• Utilice solamente el número de pozos requeridos y dé formato a los pozos de los microplates para que cada calibrador y muestra sean probados. • Añada el µL 50 de calibradores o de muestras a cada pozo.

• Añada el µL 50 de la conjugación de la enzima a cada pozo.

• Sacuda el microplate suavemente por 30 segundos para mezclarse.

• Cubra la placa con una tapa de la placa e incube en el ℃ 37 por 60 minutos.

• Deseche el contenido de la placa micro por la decantación o la aspiración. Si decanta, golpee ligeramente y borre el seco de placa con el papel absorbente.

• Añada el µL 350 de la solución del lavado, decántelo (golpecito y mancha blanca /negra) o aspírelo. Repita 4 veces adicionales para un total de 5 lavados. Una lavadora automatizada de la tira del microplate puede ser utilizada. En el final del lavado, invierta la placa y golpee ligeramente hacia fuera cualquier solución residual del lavado sobre el papel absorbente. • Añada el µL 100 del substrato a cada pozo.

• Cubra e incube en la temperatura ambiente (18-25℃) en la oscuridad para la reacción por 20 minutos. No sacuda la placa después de la adición del subestado. • Añada el µL 50 de la solución de la parada a cada pozo.

• Sacuda por 15-20 segundos para mezclar el líquido dentro de los pozos. Es importante asegurarse de que los cambios azules del color a amarillear totalmente. • Lea la absorción de cada pozo en 450 nanómetro (usando 620 a 630 nanómetro como la longitud de onda de la referencia para minimizar imperfecciones bien) en un lector micro de la placa. Los resultados se deben leer en el plazo de 30 minutos de adición paran la solución.