Prueba del suero de la tiroxina T4 Elisa Test Free T4 del ISO 110 minutos leídos tiempo

Tiroxina T4
Referencia: Pruebas DS177703 96

1. Uso previsto
Immunoensayo para la determinación cuantitativa in vitro de la tiroxina en suero humano.

2. Resumen
La tiroxina de la hormona (T4) es el producto principal secretado por la glándula tiroides y es un componente integral del sistema de regulación de la pituitario-tiroides hipotálamo-anterior. Tiene la función anabólico de influenciar metabolismo. La tiroxina se forma en una reacción de soldadura a partir de dos moléculas de DIT (3,5-diiodotyrosine) en la glándula tiroides. Es límite almacenado a la tiroglobulina en el lumina de los folículos de la tiroides y se secreta como sea necesario bajo los efectos de TSH. ¿(1, 2) el mayor parte (el > 99%) de la tiroxina total (T4) en suero está presente en proteína? forma de límite. Mientras que las concentraciones de las proteínas de transporte en suero están conforme a efectos exógenos y endógenos, la situación de las proteínas obligatorias se debe también tener en cuenta en la evaluación de la concentración de la hormona tiroidea en suero. ¿Si se ignora esto, los cambios en las proteínas obligatorias (e.g debido al estrógeno? contener preparaciones, durante embarazo o en presencia de un síndrome nefrótico etc.) puede llevar a las evaluaciones erróneas del estado metabólico de la tiroides. (3, 4, 5, 6, 7) la determinación de T4 se puede utilizar para las indicaciones siguientes: la detección de hipertiroidismo, la detección de hipotiroidismo primario y secundario, y la supervisión de la terapia de la TSH-supresión. (8)
El análisis T4 emplea un principio competitivo de la prueba con un anticuerpo dirigido específicamente contra T4. T4 endógeno, lanzado por la acción del ácido sulfónico de 8 anilino-1-naphthalene (American National Standard).

3. Los materiales los reactivo proporcionaron
• Microplate cubierto, 8 X12 tiras, 96 pozos, cubiertos primero con T4 derivant.
• Calibradores, 6 frascos, 1 ml cada uno, listos para utilizar; Concentraciones: 0 (A), 2,5 (B), 5 (C), 10 (D), 15 (E) y 30 (F) μg/dL.
• La conjugación de la enzima, 1 frasco, 6,0 ml de HRP (peroxidasa del rábano picante) etiquetó el ratón T4 monoclonal en el almacenador intermediario Tris-NaCl que contenía BSA (albúmina del suero vacuno). Contiene 0,2% preservativos ProClin300. American National Standard 1,5 mg/ml.
• Substrato, 1 frasco, 11ml, listo para utilizar, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Pare la solución, 1 frasco, 6,0 ml de 1 mol/l del ácido sulfúrico.
• Concentrado de la solución del lavado, 1 frasco, 25 ml (40X concentró), solución del lavado del PBS-tween.
• IFU, 1 copia.
• Tapa de la placa: 1 pedazo.

4. Materiales requeridos (pero no proporcionado)
• Lector de Microplate con capacidad absorbente de la longitud de onda 450nm y 620nm.
• Lavadora de Microplate.
• Incubadora.
• Coctelera de la placa.
• Micropipetas y micropipetas de varios canales que entregan 50μl con una precisión de mejor de 1,5%.
• Papel absorbente.
• Agua destilada

Método de prueba

Asegúrese que las muestras, los calibradores, y los controles de los pacientes estén en la temperatura ambiente (℃ 18-25) antes de medida. Mezcle todos los reactivo con suavemente la inversión antes de uso.

• Utilice solamente el número de pozos requeridos y dé formato a los pozos de los microplates para que cada calibrador y muestra sean probados. • Añada el µL 50 de calibradores o de muestras a cada pozo.

• Añada el µL 50 de la conjugación de la enzima a cada pozo.

• Sacuda el microplate suavemente por 30 segundos para mezclarse.

• Cubra la placa con una tapa de la placa e incube en el ℃ 37 por 60 minutos.

• Deseche el contenido de la placa micro por la decantación o la aspiración. Si decanta, golpee ligeramente y borre el seco de placa con el papel absorbente.

• Añada el µl 350 de la solución del lavado, decántelo (golpecito y mancha blanca /negra) o aspírelo. Repita 4 veces adicionales para un total de 5 lavados. Una lavadora automatizada de la tira del microplate puede ser utilizada. En el final del lavado, invierta la placa y golpee ligeramente hacia fuera cualquier solución residual del lavado sobre el papel absorbente.

• Añada el µL 100 del substrato a cada pozo.

• Cubra e incube en la temperatura ambiente (18-25℃) en la oscuridad para la reacción por 20 minutos. No sacuda la placa después de la adición del subestado. • Añada el µL 50 de la solución de la parada a cada pozo.

• Sacuda por 15-20 segundos para mezclar el líquido dentro de los pozos. Es importante asegurarse de que los cambios azules del color a amarillear totalmente.

• Lea la absorción de cada pozo en 450 nanómetro (usando 620 a 630 nanómetro como la longitud de onda de la referencia para minimizar imperfecciones bien) en un lector micro de la placa. Los resultados se deben leer en el plazo de 30 minutos de adición paran la solución