Espécimen de EBV-VCA IgA Ab Test ELISA Kit Enzyme Immunoassay Test Plasma

EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit Catalog No.: BE501A
Immunoensayo de la enzima para la detección de anticuerpo de IgA al antígeno viral del capsid (VCA) del virus de Epstein-Barr (EBV).
 
1. PRINCIPIO DEL ANÁLISIS
El EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit utiliza un sistema de detección donde los pozos del microplate están cubiertos con el antígeno recombinante correspondiente a un segmento altamente antigénico EBV-VCA. Los especímenes del suero o del plasma, controles se añaden a los pozos. Durante la incubación, los anticuerpos de IgA específicos para el presente de EBV-VCA en el espécimen atarán al antígeno recombinante fijado sobre los pozos del microplate. Los pozos se lavan para quitar los materiales desatados, y la conjugación anti-humana de la peroxidasa de IgA atará al complejo del antígeno-anticuerpo y exceso de las conjugaciones desatadas de la enzima son quitadas otra vez lavándose. El sustrato enzimático, tetramethylbenzidine (TMB), se añade sobre la incubación que el substrato será hidrolizado por la enzima encuadernada y un color azul o azulverde se convierte en los pozos que contienen los anticuerpos de EBV-VCA IgA. La reacción enzimática es parada por la adición de ácido sulfúrico. La intensidad del color desarrollada se lee espectrofotométrico en 450nm (450 nm/630 nanómetro) y es proporcional a la cantidad de anticuerpos presentes en el espécimen.
REACTIVO
 
2. Materiales proporcionados los equipos:

 
3. PROCEDIMIENTO DE ANÁLISIS

1. Traiga ELISA Kit (todos los reactivo), y a los especímenes a la temperatura ambiente antes de usar (aproximadamente 30 minutos).
2. 1:19 concentrado Dilute del almacenador intermediario del lavado con ddH2O. Por ejemplo, 5 ml de concentrado del almacenador intermediario del lavado se deben diluir a un volumen total de 100 ml con desionizado o agua destilada.
3. Para cada prueba, el en blanco del sistema uno bien como control del fondo, dos controles positivos y tres negativos. Dispense el control positivo 100ml y el duplicado negativo del control en pozos individuales. Ni las muestras ni la HRP-conjugación se deben añadir en el espacio en blanco bien.
4. Dispense 100ml del dilución de la muestra en pozos de la prueba individual excepto los controles.
5. Añada 10ml de cada muestra de la prueba en los pozos de la prueba; vórtice a mezclarse.
6. Incube por 30 minutos en 37°C
7. Lave cada uno bien 5 veces llenando cada pozo del almacenador intermediario diluido del lavado, después invirtiendo la placa vigoroso para salir toda la agua y bloqueando el borde de pozos en el papel absorbente por algunos segundos.
8. Añada 100ml de la conjugación de la enzima a cada pozo. Mézclelo suavemente remolinando la placa de microtítulo en el banco plano por los minutos 1. No añada la conjugación de la enzima al espacio en blanco bien.
9. Incube por 20 minutos en 37°C
10. Lave la placa 5 veces como paso 7.
11. Añada un descenso (50ml) de la solución A (HRP-substrato) del substrato a cada pozo, después añada un descenso (50ml) de la solución B (TMB) del substrato a cada pozo. Mézclese suavemente e incube en 37°C por 30 minutos.
12. Añada un descenso (50ml) de la solución de la parada a cada pozo para parar la coloración. Lea el valor del OD en 450 nm/630 nanómetro con el lector dual de la placa de filtro. Es opción para leer el valor del OD en 450 nanómetro con el solo lector de la placa de filtro. (usando el valor del OD del pozo en blanco para corregir toda la lectura del OD de todos los pozos)