Hombre Vitamina D El sistema ELISA. NoEl kit 

Uso previsto

Nuestro kit ELISA de vitamina D humana es para medir los niveles de vitamina D en suero humano, plasma, medios de cultivo o cualquier líquido biológico.

Preparación de las muestras

1.Sero preparación

Después de recoger la sangre entera, deje que la sangre se coagule dejándola sin perturbar a temperatura ambiente. Esto suele tomar de 10 a 20 minutos.000 rpm durante 20 minutosSi durante la reserva aparecen precipitados, la muestra debe centrifugarse de nuevo.

2.El plasmapreparación

Se recoge la sangre entera en tubos con anticoagulante (EDTA o citrato) y, después de haber sido incubada a temperatura ambiente durante 10-20 minutos, se centrifugan durante 20 minutos a 2.000-3.000 rpm.Recoger el supernatante con cuidado como muestras de plasmaSi durante la reserva aparecen precipitados, la muestra debe centrifugarse de nuevo.

3.Muestras de orina

Se recoge la orina en tubos asépticos. Se recoge cuidadosamente el supernatante después de centrifugarla durante 20 minutos a 2.000-3.000 rpm.La muestra debe centrifugarse de nuevo.El procedimiento de preparación del líquido cefalorraquídeo y del líquido pleuroperitoneal es el mismo que el de la muestra de orina.

4.Muestras de células

Si se desea detectar las secreciones de células, se recoge el supernatante de cultivo en tubos asépticos.Si quieres detectar componentes intracelulares, diluir las células a 1X100/ml con PBS (pH 7,2-7,4). Las células fueron destruidas para liberar componentes intracelulares mediante congelación y descongelación repetidas.Recoger el supernatante con cuidado después de centrifugarlo durante 20 min a 2 °C.Si durante la reserva aparecen precipitados, la muestra debe centrifugarse de nuevo.

5.Muestras de tejido

Las muestras de tejido se cortan, pesan, congelan en nitrógeno líquido y se almacenan a -80 °C para su uso futuro.Recoger el supernatante con cuidado después de centrifugarlo durante 20 min a 2 °C.Alicotar el supernatante para el ensayo ELISA y su uso futuro.

Materiales suministrados con el kEs el

Las notas:

• Conservar el kit a 4°C al recibirlo.El kit debe estar equilibrado a temperatura ambiente antes del ensayo.Se vuelven a sellar en papel de cerradura y se conservan a 4°C..
• Puede aparecer precipitación en el tampón de lavado concentrado. Por favor, caliente el tampón para disolver todos los precipitados, lo que no afectará los resultados.
• Para evitar errores experimentales, debe utilizarse una pipeta precisa. Las muestras deben añadirse a la microplaca en menos de 5 minutos.se recomienda la pipeta de múltiples canales.
• Si el valor de OD de la muestra es mayor que el primer pozo de estándares, se recomienda que se utilice una curva estándar.diluir la muestra (n veces) antes del ensayoAl calcular la concentración original de vitamina D, se debe multiplicar el factor de dilución total (XnX5).
• Para evitar la contaminación cruzada, los selladores de microplacas se utilizan una sola vez.
• Por favor, mantenga el sustrato lejos de la luz.
• Toda la operación deberá realizarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante, los resultados de las cuales se determinarán mediante el lector de placas de microtiter.
• Todas las muestras, el tampón de lavado y los desechos deben tratarse como agentes infecciosos.
• Los reactivos de lotes diferentes no deben mezclarse.