Kit de pruebas de TNF-α Elisa en humanos

Uso previsto

Este kit permite determinar las concentraciones de TNF-α en supernatados de cultivo de células humanas.

Procedimiento de evaluación

1Diluir y añadir muestra:Diluir densidad original Estándar según la tabla inferior: 400ng/L 5 Standard 150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 200ng/L 4 Standard 150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 100ng/L 3 Standard 150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 50ng/L 2 Standard 150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 25ng/L 1 Standard 150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2. añadir la muestra:Configurar los pozos en blanco por separado (los pozos de comparación en blanco no añaden la muestra y el reactivo HRP-Conjugate, sino que cada paso de la operación es el mismo).Añadir 50 μl de estándar a la tira de MicroelisaAñadir 40 μl de dilución de muestra a la muestra de ensayo, luego añadir 10 μl de muestra de ensayo (la dilución final de la muestra es de 5 veces), añadir la muestra a la muestra, no tocar la pared de la muestra tanto como sea posible, y mezclar suavemente.

3.Incubar: después de cerrar la placa con la membrana de la placa de cierre, incubar durante 30 min a 37°C.

4.Configurar líquido: solución de lavado 30 veces (o 20 veces) diluida 30 veces (o 20 veces) con agua destilada y reserva.

5Lavar: Descubrir la membrana de la placa de cierre, desechar el líquido, secar con un columpio, añadir tampón de lavado a cada pozo, mantenerlo durante 30 minutos y luego drenar, repetir 5 veces, secar con una palmada.

6. añadir enzima: añadir 50 μl de reactivo HRP-Conjugado a cada recipiente, excepto el recipiente en blanco.

7.Incubación: operación con 3.

8.lavado: Operación con 5.

9.color: añadir a cada una de las hojas la solución de cromógeno A 50ul y la solución de cromógeno B 50ul, evitar la conservación de la luz durante 10 minutos a 37°C

10.Detener la reacción: añadir solución de parada50μl a cada bien, detener la reacción ((el cambio de color azul a amarillo).

11. ensayo: tomar en blanco como cero, leer la absorbancia a 450 nm después de añadir la solución de parada y dentro de los 15 min.

Requisitos de muestra

1. extraer tan pronto como sea posible después de la recogida de la muestra, y de acuerdo con la literatura pertinente, y se debe experimentar tan pronto como sea posible después de la extracción.1 muestra puede conservarse a 20 °C para preservar, Evite ciclos de congelación y descongelación repetidos.

2No se puede detectar la muestra que contiene NaN3, porque NaN3 inhibe el HRP activo.

Notas importantes

1. el kit se saca del ambiente refrigerado debe ser equilibrado 15-30 minutos a temperatura ambiente, las placas de ELISA recubiertas si no se ha consumido después de abrir,La placa debe guardarse en una bolsa sellada..

2. el amortiguador de lavado va a la separación de cristalización, se puede calentar el agua ayuda a disolver cuando se diluye.

3. añadir la muestra con muestreo Cada paso, y corregir su precisión con frecuencia, evita el error experimental. añadir la muestra dentro de 5 min, si el número de muestras es mucho, recomiendo utilizar Voley.

4. si el contenido de material de ensayo es excesivamente elevado (la DO de la muestra es mayor que la primera medida estándar), diluir la muestra (n veces), diluir y multiplicar por el factor de dilución.(×n×5).

5La membrana de la placa de cierre sólo limita el uso desechable, para evitar la contaminación cruzada.

6El sustrato evade la conservación de la luz.

7Por favor, siga estrictamente las instrucciones de uso. Para determinar los resultados de la prueba, debe utilizarse el lector de microtiter como estándar.

8Las muestras, el tampón de lavado y cada tipo de desechos deben ser de acuerdo con el proceso de material infeccioso.

9No mezcle los reactivos con los de otros lotes.