Kit de prueba de Irisina humana ELISA

Uso previsto

Este kit permite determinar las concentraciones de Irisina en suero humano, plasma y otros fluidos biológicos.

Procedimiento de evaluación

1.Diluir y añadir muestra:Diluir Densidad original Estándar según la siguiente tabla:

2. añadir muestra:Configurar los pozos en blanco por separado (los pozos de comparación en blanco no añaden muestra y reactivo HRP-Conjugate, de lo contrario cada paso de la operación es el mismo).Añadir 50 μl de estándar a la tira de Microelisa, añadir dilución de muestra de 40μl al pozo de prueba de la muestra, luego añadir la muestra de prueba de 10μl (la dilución final de la muestra es de 5 veces), añadir la muestra a los pozos, no tocar la pared del pozo en la medida de lo posible, y mezclar suavemente.

3.Incubar: después de cerrar la placa con la membrana de la placa de cierre, incubar durante 30 min a 37°C.

4.Configurar líquido: solución de lavado 30 veces (o 20 veces) diluida 30 veces (o 20 veces) con agua destilada y reserva.

5.lavado: Descubrir la membrana de la placa de cierre, desechar el líquido, secar con un columpio, añadir tampón de lavado a cada pozo, permanecer durante 30 segundos y luego drenar, repetir 5 veces, secar con una palmada.

6. añadir enzima: añadir 50 μl de reactivo HRP-conjugado a cada pozo, excepto pozo en blanco.

7.Incubación: operación con 3.

8.lavado: Operación con 5.

9.color: añadir a cada pozo la solución de cromógeno A 50ul y la solución de cromógeno B 50ul, evitar la conservación de la luz durante 10 minutos a 37°C

10.Detener la reacción: Añadir solución de parada50μl a cada pozo, detener la reacción ((el cambio de color azul a amarillo).

11. ensayo: tomar el pozo en blanco a cero, leer la absorbancia a 450 nm después de añadir la solución de parada y dentro de los 15 min.

Requisitos de muestra

1.extraer lo antes posible después de la recogida de la muestra y de acuerdo con la literatura pertinente, y experimentar lo antes posible después de la extracción.la muestra puede mantenerse a -20 °C para preservar, Evite ciclos de congelación y descongelación repetidos.

2"No se puede detectar la muestra que contiene NaN3, porque NaN3 inhibe el HRP activo.

3.extraer lo antes posible después de la recogida de la muestra y de acuerdo con la literatura pertinente, y experimentar lo antes posible después de la extracción.la muestra puede mantenerse a -20 °C para preservar, Evite ciclos de congelación y descongelación repetidos.

4No se puede detectar la muestra que contiene NaN3, porque NaN3 inhibe el HRP activo.

Notas importantes

• El kit se saca del ambiente de refrigeración y se debe equilibrar durante 15 a 30 minutos a temperatura ambiente, las placas ELISA revestidas si no se han agotado después de abrirse,La placa debe guardarse en una bolsa sellada..
• La limpieza del tampón hace la separación de cristalización, puede ser calentado el agua ayuda a disolver cuando se diluye.
• añadir muestra con muestreo Cada paso, y corregir su precisión con frecuencia, evita el error experimental. añadir muestra dentro de 5 min, si el número de muestras es mucho, recomiendo utilizar Volley.
• si el contenido de material de ensayo es excesivamente elevado (la DO de la muestra es mayor que la del primer pozo estándar ), diluir la muestra (n veces), diluir y multiplicar por el factor de dilución.(×n×5).
• La membrana de la placa de cierre sólo limita el uso desechable, para evitar la contaminación cruzada.
• El sustrato evita la preservación de la luz.
• Por favor, siga estrictamente las instrucciones de uso. La determinación del resultado de la prueba debe tomar el lector de placas de microtiter como estándar.
• Todas las muestras, el amortiguador de lavado y cada tipo de desechos deben ajustarse al proceso del material infeccioso.
• No mezcle los reactivos con los de otros lotes.