RUO El kit Elisa para el HBsAg

Análisis de inmunosorbente ligado a enzimas para la detección de HBsAgen suero o plasma

La EIA de HBsAg es un ensayo inmunológico sandwich simultáneo de fase sólida, que emplea anticuerpos monoclonales y anticuerpos policlonales específicos para HBsAg.Los microtiter están cubiertos con anticuerpos monoclonales específicos para HBsAg.Se añade una muestra de suero a los pozos de Microtiter recubiertos de anticuerpos junto con anticuerpos policlonales conjugados por enzimas.Luego se lava el plato para eliminar el material libreFinalmente, se añade una solución de sustrato a los pozos e incubación. Un color azul se desarrollará en proporción a la cantidad de HBsAg presente en la muestra. The enzyme-substrate reaction can be stopped and the result is visualized by naked eye or read by EIA plate reader for absorbance at the wavelength of 450 nm(450 nm/630 nm) and is proportional to the amount of antibodies present in the specimen- ¿ Qué?

Materiales suministrados junto con los kits:

Procedimiento de ensayo:

Se recomienda encarecidamente analizar cada muestra y los controles en dos copias.

1. Se dispensará una gota (50 μl) de control positivo y de control negativo en duplicados en los pozos respectivos.y 50ul de muestras de suero o plasma en los respectivos pozos de ensayo.
2. Añadir una gota (50 μl) de Enzima Conjugado a cada pozo. Mezclar suavemente haciendo girar la placa de microtiter en un banco plano durante 1 minuto.No agregue Enzyme Conjugate al pozo en blanco.
3. Colocar las placas de microtiter en una caja humidificada e incubar a 37°C durante 30 minutos.
4. Lavar cada pozo 5 veces llenando cada pozo con amortiguador de lavado diluido, luego invertir el plato vigorosamente para sacar toda el agua y bloquear el borde de los pozos en papel absorbente durante unos segundos.
5. Se añade una gota (50 μl) de solución de sustrato A (substrato HRP) a cada pozo, y luego se añade una gota (50 μl) de solución de sustrato B (TMB) a cada pozo.
6. Añadir 1 gota (50μl) de solución de parada a cada pozo para detener la reacción de color.Es opcional leer el valor de OD a 450 nm con un solo lector de placas de filtro. (usando el valor de OD del pozo en blanco para corregir toda la lectura de OD de todos los pozos)