Método gamma Murine de Kit Mouse Interferon Gamma Sandwich de la prueba de Ifn RUO

Γ del interferón del ratón; Interferón gamma; IFN-γ; IFN-gamma; IFNG; ELISA Kit

Para la determinación in vitro cuantitativa de las concentraciones del γ del interferón (IFN-γ) en suero del ratón, plasma, medios de cultivo o cualquier líquido biológico.

Principio

Este equipo de ELISA utiliza el bocadillo-ELISA como el método. El stripplate de Microelisa proporcionado en este equipo se ha cubierto primero con un anticuerpo específico a IFN-γ. Los estándares o las muestras se añaden a los pozos apropiados del stripplate de Microelisa y combinaron al anticuerpo específico. Entonces una peroxidasa del rábano picante (HRP) - anticuerpo conjugado específico para IFN-γ se añade a cada stripplate de Microelisa bien y se incuba. Se quitan los componentes libres. La solución del substrato de TMB se añade a cada pozo. Solamente esos pozos que contienen IFN-γ y el anticuerpo conjugado HRP de IFN-γ aparecerán azules en color y después darán vuelta amarillo después de la adición de la solución de la parada. La densidad óptica (OD) se mide espectrofotométrico en una longitud de onda de 450 nanómetro. El valor del OD es proporcional a la concentración de IFN-γ. Usted puede calcular la concentración de IFN-γ en las muestras comparando el OD de las muestras a la curva estándar.

Materiales proporcionados el equipo

• Dilución de estándares

Diez pozos se fijan para los estándares en un stripplate de Microelisa. En bien 1 y bien 2, la solución estándar 100μl y el almacenador intermediario estándar del dilución 50μl se añaden y se mezclan bien. En bien 3 y bien 4, la solución 100μl de bien 1 y 2 se añade bien respectivamente. Después el almacenador intermediario estándar del dilución 50μl se añade y se mezcla bien. la solución 50μl se desecha del pozo 3 y bien 4. En bien 5 y bien 6, la solución 50μl de bien 3 y 4 se añade bien respectivamente. Después el almacenador intermediario estándar del dilución 50μl se añade y se mezcla bien. En bien 7 y bien 8, la solución 50μl de bien 5 y 6 se añade bien respectivamente. Después el almacenador intermediario estándar del dilución 50μl se añade y se mezcla bien. En bien 9 y bien 10, la solución 50μl de bien 7 y 8 se añade bien respectivamente. Después el almacenador intermediario estándar del dilución 50μl se añade y se mezcla bien. la solución 50μl se desecha del pozo 9 y bien 10. Después del dilución, el volumen total en todos los pozos es 50μl y las concentraciones son 180 pg/ml, 120pg/ml, 60 pg/ml, 30pg/ml y 15 pg/ml, respectivamente.

Cálculo de resultados

Las concentraciones sabidas del estándar y de su lectura correspondiente OD de IFN-γ del ratón se trazan en la escala del registro (x-AXIS) y la escala del registro (y-AXIS) respectivamente. La concentración de ratón IFN-γ en muestra es determinada por el trazado el O.D. de la muestra en Y-AXIS. La concentración original es calculada multiplicando el factor del dilución.

Precisión

precisión del Intra-análisis (precisión dentro de un análisis): 3 muestras con el ratón bajo, medio y de alto nivel IFN-γ fueron probadas 20 veces en una placa, respectivamente.

precisión del Inter-análisis (precisión entre los análisis): 3 muestras con el ratón bajo, medio y de alto nivel IFN-γ fueron probadas en 3 diversas placas, 8 réplicas en cada placa.

CV (%) = SD/meanX100

Intra-análisis: CV<10>

Inter-análisis: CV<12>

Gama del análisis

3pg/ml-200 pg/ml

Sensibilidad:

0.8pg/ml