Subunidad Alpha Mouse IL2R CD25 IL2-RA ELISA Kit del receptor Interleukin-2

Alfa de la subunidad del receptor del ratón Interleukin-2; IL2R; CD25; Equipo de IL2-RA ELISA

Materiales proporcionados el equipo

Requisitos del espécimen

• la coagulación del suero en la temperatura ambiente 10-20 minutos, minuto de la centrifugación 20 a la velocidad de RPM 2000-3000 quita el sobrenadante, si apareció la precipitación, centrífugo otra vez.
• el EDTA adecuado plasma-uso o tratar con citrato el plasma como anticoagulante, mezcla 10-20 minutos, minuto de la centrifugación 20 a la velocidad de RPM 2000-3000 quita el sobrenadante, si apareció la precipitación, centrífugo otra vez.
• Orina-recoja para demandar un envase estéril, centrifugación 20 que el minuto a la velocidad de RPM 2000-3000 quita el sobrenadante, si apareció la precipitación, centrífugo otra vez. La operación de Hydrothorax y referencia flúida cerebroespinal a ella.
• el cultivo celular flotante-detectar componentes secretores, recoger para demandar un envase estéril, minuto de la centrifugación 20 a la velocidad de RPM 2000-3000 para quitar el sobrenadante, detectar la composición de células, suspensión con PBS (PH7.2-7.4), concentración de la célula de Dilut de la célula alcanzó 1 millón/ml, ciclos hielo-deshielo repetidos, células del daño y el lanzamiento de componentes intracelulares, minuto de la centrifugación 20 a la velocidad de RPM 2000-3000 quita el sobrenadante, si apareció la precipitación, centrífugo otra vez.
• Las muestras de tejido después de cortar muestras, comprueban el peso, añaden PBS (PH7.2-7.4), congelado rápidamente con nitrógeno líquido, mantienen muestras en 2-8℃ después de derretir, añaden PBS (PH7.4), homogeneizado a mano o las amoladoras, minuto de la centrifugación 20 a la velocidad de RPM 2000-3000 quitan el sobrenadante.
• extraiga cuanto antes después de la colección de espécimen, y según la literatura relevante, y debe ser experimento cuanto antes después de la extracción. Si no puede, el espécimen se puede mantener el ℃ -20 para preservar, Avoid repitió ciclos hielo-deshielo.
• No puede detectar la muestra que contienen NaN3, porque NaN3 inhibe HRP activo.

Principio

Este equipo de ELISA utiliza el bocadillo-ELISA como el método. El stripplate de Microelisa proporcionado en este equipo se ha cubierto primero con un anticuerpo específico a IL2R. Los estándares o las muestras se añaden a los pozos apropiados del stripplate de Microelisa y combinaron al anticuerpo específico. Entonces una peroxidasa del rábano picante (HRP) - anticuerpo conjugado específico para IL2R se añade a cada stripplate de Microelisa bien y se incuba. Se quitan los componentes libres. La solución del substrato de TMB se añade a cada pozo. Solamente esos pozos que contienen IL2R y HRP conjugaron el anticuerpo del thrombomodulin aparecerán azules en color y después darán vuelta amarillo después de la adición de la solución de la parada. La densidad óptica (OD) se mide espectrofotométrico en una longitud de onda de 450 nanómetro. El valor del OD es proporcional a la concentración de IL2R. Usted puede calcular la concentración de IL2R en las muestras comparando el OD de las muestras a la curva estándar.

Notas:

• Almacene el equipo en 4°C sobre recibo. El equipo se debe equilibrar a la temperatura ambiente antes del análisis. Quite cualquier tira innecesaria de la placa Anticuerpo-revestida de IL2R, reséllela en hoja zip-lock y guarde en 4°C.
• Los precipitados pueden aparecer en almacenador intermediario que se lava concentrado. Caliente por favor el almacenador intermediario para disolver todos los precipitados, que no afectarán a los resultados.
• La pipeta exacta se debe utilizar para evitar error experimental. Las muestras se deben añadir al Microplate en menos de 5 minutos. Si se incluyen un gran número de muestras, se recomienda la pipeta del canal múltiple.
• La curva estándar se debe incluir en cada análisis. Se recomiendan los pozos replegados. Si el valor del OD de la muestra es mayor que el primer pozo de estándares, diluya por favor la muestra (tiempos de n) antes de prueba. Al calcular la concentración original del thrombomodulin, multiplique por favor el factor total del dilución (XnX5).
• Para evitar la contaminación cruzada, los selladores de Microplate están para el uso de una sola vez solamente.
• Guarde por favor el substrato lejos de la luz.
• Toda la operación debe ser acuerdo con las instrucciones del fabricante estrictamente. Los resultados determinados por el lector de la placa de microtítulo.
• Todas las muestras, almacenador intermediario que se lava y basuras se deben tratar como agentes infecciosos.
• Los reactivo de diversas porciones no deben ser mezclados.