Thrombomodulin humano TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kit

Thrombomodulin humano, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit For Research Use

Thrombomodulin humano, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit

Materiales proporcionados el equipo

Principio

Este equipo de ELISA utiliza el bocadillo-ELISA como el método. El stripplate de Microelisa proporcionado en este equipo se ha cubierto primero con un anticuerpo específico al thrombomodulin. Los estándares o las muestras se añaden a los pozos apropiados del stripplate de Microelisa y combinaron al anticuerpo específico. Entonces una peroxidasa del rábano picante (HRP) - anticuerpo conjugado específico para el thrombomodulin se añade a cada stripplate de Microelisa bien y se incuba. Se quitan los componentes libres. La solución del substrato de TMB se añade a cada pozo. Solamente esos pozos que contienen thrombomodulin y HRP conjugaron el anticuerpo del thrombomodulin aparecerán azules en color y después darán vuelta amarillo después de la adición de la solución de la parada. La densidad óptica (OD) se mide espectrofotométrico en una longitud de onda de 450 nanómetro. El valor del OD es proporcional a la concentración de thrombomodulin. Usted puede calcular la concentración de thrombomodulin en las muestras comparando el OD de las muestras a la curva estándar.

Preparación de la muestra

1. preparación del suero

Después de la colección de la sangre entera, permita que la sangre coagule dejándola imperturbada en la temperatura ambiente. Esto tarda generalmente 10-20 minutos. Quite el coágulo centrifugando en 2,000-3,000 RPM por 20 minutos. Si los precipitados aparecen durante la reserva, la muestra se debe centrifugated otra vez.

2. preparación del plasma

Recoja la sangre entera en los tubos con el anticoagulante (EDTA o citrato). Después de incubado en la temperatura ambiente por 10-20 minutos, los tubos centrifugated para el minuto 20 en 2,000-3,000 RPM. Recoja el sobrenadante cuidadosamente como muestras del plasma. Si los precipitados aparecen durante la reserva, la muestra se debe centrifugated otra vez.

3. Muestras de orina

Recoja la orina en los tubos asépticos. Recoja el sobrenadante cuidadosamente después de centrifugar para el minuto 20 en 2,000-3,000 RPM. Si los precipitados aparecen durante la reserva, la muestra se debe centrifugated otra vez. El procedimiento de la preparación del líquido cerebroespinal y del líquido pleuroperitoneal es lo mismo que el de la muestra de orina.

4. Muestras de la célula

Si usted quiere detectar las secreciones de células, recoja el sobrenadante de la cultura en los tubos asépticos. Recoja el sobrenadante cuidadosamente después de centrifugar para el minuto 20 en 2,000-3,000 RPM. Si usted quiere detectar componentes intracelulares, diluya las células a 1X106/ml con PBS (pH 7.2-7.4). Las células fueron destruidas para lanzar componentes intracelulares congelando repetida y deshelando. Recoja el sobrenadante cuidadosamente después de centrifugar para el minuto 20 en 2,000-3,000 RPM. Si los precipitados aparecen durante la reserva, la muestra se debe centrifugated otra vez.

5. muestras de tejido

Las muestras de tejido se cortan, se pesan, se congelan en nitrógeno líquido y se almacenan en -80℃ para uso futuro. Las muestras de tejido fueron homogeneizadas después de añadir PBS (pH 7,4). Las muestras se deben actuar en 4℃. Recoja el sobrenadante cuidadosamente después de centrifugar para el minuto 20 en 2,000-3,000 RPM. Parte alícuota el sobrenadante para el análisis de ELISA y el uso futuro.

Notas:

• La extracción de la muestra y el análisis de ELISA se deben realizar cuanto antes después de la colección de la muestra. Las muestras se deben extraer según la literatura relevante. Si el análisis de ELISA no se puede realizar inmediatamente, las muestras se pueden almacenar en -20℃.Repeated que los ciclos hielo-deshielo deben ser evitados.
• Nuestros equipos no se pueden utilizar para las muestras con NaN3 que pueda inhibir la actividad de HRP.