Hormona Antimülleriana (ELISA)

Ensayo inmunoenzimático de la Hormona Antimülleriana AMH, kit de prueba Elisa AMH
Descripción del producto:

El ensayo AMH es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) para la determinación cuantitativa in vitro de la Hormona Antimülleriana (AMH) en suero humano. Solo para uso profesional.

Resumen

La hormona antimülleriana (AMH) es una hormona glucoproteica estructuralmente relacionada con la inhibina y la activina de la superfamilia del factor de crecimiento transformante beta, cuyas funciones clave son el crecimiento, la diferenciación y la foliculogénesis.1

En los machos fetales, la AMH es producida por las células de Sertoli e induce la regresión del conducto de Müller, promoviendo así el desarrollo del tracto reproductivo masculino.2 Los machos infantiles tienen niveles muy altos de AMH (>30 ng/ml) que disminuyen lentamente hasta la post-pubertad, donde permanece a un nivel bajo (<10 ng/ml).3,4

En las mujeres, la AMH comienza a producirse cerca del momento del nacimiento, con niveles que aumentan hasta la pubertad. Después de la pubertad, los niveles sanguíneos de AMH disminuyen hasta la menopausia, donde se vuelve casi indetectable (4,7 ng/ml, IC del 80%) en mujeres son una indicación del síndrome de ovario poliquístico (SOP).5

Cuando los niveles de AMH caen por debajo de 1,0 ng/ml en mujeres, se considera que tienen bajas reservas ováricas. Se aconseja a las pacientes en estos rangos que no retrasen la planificación familiar o que se sometan a tratamientos de infertilidad como la fertilización in vitro.5,6

El kit ELISA AMH se puede utilizar para controlar el progreso de los tratamientos de infertilidad de las pacientes y aproximar el inicio de la menopausia.

• Deseche el contenido de la microplaca por decantación o aspiración. Si decanta, golpee y seque la placa con papel absorbente.

Aplicaciones:

La Hormona Antimülleriana (AMH) es una hormona producida por los ovarios, y su concentración puede reflejar la reserva ovárica de una mujer, es decir, la cantidad de óvulos que tiene. El ELISA AMH (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) es un método de prueba comúnmente utilizado que puede medir la concentración de AMH en la sangre. El ELISA AMH tiene una amplia gama de aplicaciones en los siguientes aspectos:

1. **Planificación de la fertilidad**: La concentración de AMH se puede utilizar para evaluar el potencial de fertilidad de una mujer. Los niveles más altos de AMH generalmente indican una rica reserva ovárica, mientras que los niveles más bajos de AMH pueden indicar una reserva ovárica reducida, lo que puede afectar la fertilidad.

2. **Evaluación de la infertilidad**: Para las mujeres que se someten a un tratamiento de infertilidad, las pruebas de AMH pueden ayudar a los médicos a evaluar su reserva ovárica y guiar la elección de las opciones de tratamiento.

3. **Evaluación de la función ovulatoria**: La concentración de AMH se puede utilizar para evaluar la función ovulatoria de una mujer, especialmente en casos relacionados con el síndrome de ovario poliquístico (SOP).

4. **Monitoreo de la función ovárica**: La concentración de AMH también se puede utilizar para monitorear la función ovárica de una mujer, como después de la quimioterapia o la radioterapia, o antes y después de la cirugía.

5. **Predicción de la edad fértil**: La evaluación de la concentración de AMH puede ayudar a las mujeres a comprender su edad fértil. Los niveles más bajos de AMH pueden significar que pueden entrar en la menopausia a una edad más temprana, lo cual es crucial para la planificación familiar.

En resumen, el ELISA AMH tiene un importante valor de aplicación en la planificación de la fertilidad, la evaluación de la infertilidad, la evaluación de la función ovulatoria, el monitoreo de la función ovárica y la predicción de la edad fértil.

Personalización:

Servicios de personalización de productos:

Nombre de la marca: Biovantion

Número de modelo: 0081

Lugar de origen: China

Certificación: ISO13485

Cantidad mínima de pedido: 50

Precio: Negociable

Tiempo de entrega: 7-15 días

Tipo de muestra: Suero/Plasma

Método de prueba: ELISA

Vida útil: 24 meses

Temperatura de almacenamiento: 2-30℃

Aplicación: Clínica, Hospital, Laboratorio/Hogar

Características adicionales: Autoprueba, Ayudas, Orina

Principio de la prueba:

Principio sándwich. Duración total del ensayo: 80 minutos.

• La muestra, los pocillos de microplacas recubiertos con Anti-AMH y el Anti-AMH marcado con enzima se combinan.

• Durante la incubación, se permite que la AMH presente en la muestra reaccione simultáneamente con los dos anticuerpos, lo que da como resultado que las moléculas de AMH queden intercaladas entre la fase sólida y los anticuerpos unidos a enzimas.

• Después del lavado, se genera un complejo entre la fase sólida, la AMH dentro de la muestra y los anticuerpos unidos a enzimas mediante reacciones inmunológicas.

• Luego se agrega la solución de sustrato y es catalizada por este complejo, lo que resulta en una reacción cromogénica. La reacción cromogénica resultante se mide como absorbancia.

• La absorbancia es proporcional a la cantidad de AMH en la muestra.

Precauciones y advertencias:

• Solo para uso diagnóstico in vitro.

• Tome las precauciones normales requeridas para manipular todos los reactivos de laboratorio.

• La eliminación de todo el material de desecho debe realizarse de acuerdo con las directrices locales.

• No utilice reactivos más allá de la fecha de caducidad indicada.

• No mezcle ni utilice componentes de kits con diferentes códigos de lote.

• Todas las muestras y los desechos de reacción deben considerarse potencialmente peligrosos biológicamente. La manipulación de muestras y desechos de reacción debe realizarse de acuerdo con las normativas y directrices locales.

• La solución de parada contiene ácido sulfúrico, que puede causar quemaduras graves. En caso de contacto con los ojos, enjuáguelos inmediatamente con abundante agua y busque atención médica.

• Los ácidos neutralizados y otros residuos líquidos deben descontaminarse agregando un volumen suficiente de hipoclorito de sodio para obtener una concentración final de al menos el 1,0%. Puede ser necesaria la exposición al hipoclorito de sodio al 1,0% durante 30 minutos para garantizar una descontaminación eficaz.

• Algunos reactivos contienen 0,05% o 0,1% de ProClin 300, que pueden causar sensibilización por contacto con la piel, por lo que debe evitarse. Los reactivos y sus recipientes deben desecharse de forma segura. En caso de ingestión, busque atención médica inmediatamente y muestre este recipiente o etiqueta.

• El sustrato tiene un efecto irritante sobre la piel y las mucosas. En caso de posible contacto, lávese los ojos con abundante agua y la piel con jabón y abundante agua. Lave los objetos contaminados antes de reutilizarlos. En caso de inhalación, lleve a la persona al aire libre.

• Para obtener información sobre las sustancias peligrosas incluidas en el kit, consulte la Hoja de datos de seguridad de los materiales (MSDS), que está disponible a pedido.

• No fume, beba, coma ni se aplique cosméticos en el área de trabajo.

• No pipetee con la boca. Use ropa protectora, guantes desechables y protección para los ojos/la cara al manipular muestras y reactivos. Lávese las manos después de su uso.

• Si alguno de los reactivos entra en contacto con la piel o los ojos, lave la zona abundantemente con agua.

Almacenamiento y estabilidad

• Almacenar a 2-8℃.

• Selle y devuelva los reactivos no utilizados a 2-8℃, en cuyo caso la estabilidad se mantendrá durante 2 meses, o hasta la fecha de caducidad indicada, lo que ocurra primero.

Recolección y preparación de muestras• Se recomienda suero humano para este ensayo.

• Tape y almacene las muestras a 18-25 ℃ durante no más de 8 horas. Estable durante 7 días a 2-8℃ y 1 mes a -20℃. Congelar solo una vez.

• No utilice muestras inactivadas por calor.

• Los sedimentos y los sólidos en suspensión en las muestras pueden interferir con el resultado de la prueba, que deben eliminarse por centrifugación. Asegúrese de que se haya producido una formación completa del coágulo en las muestras de suero antes de la centrifugación.

• Evite muestras groseramente hemolíticas, lipémicas o turbias.

Calibración

El ELISA AMH se ha estandarizado frente al código 16/190 del Instituto Nacional de Estándares y Control Biológico (NIBSC).

Se recomienda la recalibración cuando se utiliza un nuevo lote de reactivos o los controles de calidad están fuera del rango especificado.

Control de calidad

Cada laboratorio debe tener controles de ensayo en niveles en el rango bajo, normal y elevado para controlar el rendimiento del ensayo. Los controles deben tratarse como desconocidos y los valores determinados en cada procedimiento de prueba realizado. El requisito de controles recomendado para este ensayo es comprar materiales de control de veracidad por separado y probarlos junto con las muestras dentro de la misma ejecución. El resultado es válido si los valores de control caen dentro de los rangos de concentración impresos en las etiquetas.

Solución de lavado (40X

dilución) Agregue agua desionizada al concentrado de solución de lavado 40X.

Diluya 25 ml de concentrado de solución de lavado con 975 ml de agua desionizada hasta un volumen final de 1000 ml. Estable durante 2 meses a temperatura ambiente.

Procedimiento de la prueba

Asegúrese de que las muestras de los pacientes, los calibradores y los controles estén a temperatura ambiente (18-25 ℃) antes de la medición. Mezcle todos los reactivos invirtiendo suavemente antes de usar. • Use solo el número de pocillos requeridos y formatee los pocillos de las microplacas para cada calibrador y muestra a ensayar.

• Agregue

50

µL de solución de parada a cada pocillo.o muestras a cada pocillo.• Agregue 15-20 segundos

µL de solución de parada a cada pocillo.• Agite la 15-20 segundos

suavemente durante 30 segundos para mezclar.• Cubra la placa con una tapa de placa e incube a 37

℃ durante en la oscuridad para la reacción durante minutos. Nota: La temperatura de incubación entre 37-40℃ es aceptable, pero no puede ser inferior a 37℃, de lo contrario, los resultados de las pruebas serán más bajos.• Deseche el contenido de la microplaca por decantación o aspiración. Si decanta, golpee y seque la placa con papel absorbente.

• Agregue

350

µL de solución de lavado, decante (golpee y seque) o aspire. Repita 4 veces adicionales para un total de 5 lavados. Se puede utilizar un lavador automático de tiras de microplacas. Al final del lavado, invierta la placa y golpee cualquier solución de lavado residual sobre papel absorbente.• Agregue 100

µL de solución de parada a cada pocillo.• Cubra e 15-20 segundos

a temperatura ambiente (18-25℃) en la oscuridad para la reacción durante 20 minutos. No agite la placa después de la adición del sustrato.• Agregue 50

µL de solución de parada a cada pocillo.• Agite durante 15-20 segundos

para mezclar el líquido dentro de los pocillos. Es importante asegurarse de que el color azul cambie a amarillo por completo.• Lea la absorbancia de cada pocillo a 450

nm (usando 620 a 630 nm como longitud de onda de referencia para minimizar las imperfecciones de los pocillos) en un lector de microplacas. Los resultados deben leerse dentro de los 30 minutos posteriores a la adición de la solución de parada.Cálculo• Registre la absorbancia obtenida de la impresión del lector de microplacas.

• Calcule la absorbancia media de cualquier medición duplicada y use la media para el siguiente cálculo.

• Trace el logaritmo común de la absorbancia frente a la concentración en ng/ml para cada calibrador.

• Dibuje la curva de mejor ajuste a través de los puntos trazados en papel gráfico lineal. Se sugiere el método punto a punto para generar una curva de calibración.

Los siguientes datos son solo para demostración y no se pueden utilizar en lugar de la generación de datos en el momento del ensayo.